作者：申新 于良 张靖 李胜男 潘承恩 作者单位：西安交通大学医学院第一附属医院：1麻醉科，2肝胆外科，3妇产科，陕西 西安 710061 【摘要】  目的： 探讨白藜芦醇(Res)对宫颈癌C33A，SiHa和HeLa细胞增殖与凋亡的影响. 方法: MTT法检测不同浓度Res对C33A，SiHa和HeLa细胞的抑制率. 流式细胞仪检测细胞的凋亡率及细胞周期. 荧光显微镜观测凋亡细胞. 结果: Res在一定浓度范围内，以浓度和时间依赖的方式抑制宫颈癌C33A，SiHa 和HeLa细胞的生长（P<0.01）. 荧光显微镜下细胞呈现典型的凋亡性改变. Res对细胞周期无明显影响. 结论： Res通过诱导细胞凋亡以时间依赖和浓度依赖的方式抑制宫颈癌C33A，SiHa和HeLa细胞的生长. 【关键词】  白藜芦醇；宫颈肿瘤；细胞凋亡；细胞增殖  0引言 白藜芦醇（Resveratrol, Res）是广泛存在于葡萄、果类、虎杖等多种食物、药用植物中的一种多酚类化合物. 研究表明，Res具有广泛的预防和抗肿瘤作用，它对白血病、乳腺癌、卵巢癌、肝癌、结肠癌、鼻咽癌、喉癌、甲状腺癌等多种癌瘤细胞具有明显的抑制作用［1-6］. 但目前对Res抑制宫颈癌的研究还远未深入. 宫颈癌(cervical cancer)是最常见的女性生殖道肿瘤，高居发展中国家女性肿瘤发病率的首位. 研究发现，宫颈癌的发生与人乳头瘤病毒（human papilloma virus HPV）感染密切相关，本实验选择3种宫颈癌细胞株，即宫颈腺癌细胞株HeLa、宫颈鳞癌细胞株SiHa和C33A，其中HeLa和SiHa为 HPV阳性的细胞株，C33A为HPV阴性的细胞株. 研究Res对人宫颈癌细胞株的增殖与凋亡的影响，旨在探讨Res对宫颈癌潜在的治疗作用. 1材料和方法 1.1材料人宫颈癌细胞株C33A，SiHa和HeLa由西安交通大学医学院实验医学中心惠赠；Res购自Sigma公司，纯度99%；RPMI1640培养基购自Invitrogen公司；MTT购自Amressco公司；DMSO购自天津巴斯夫化工有限公司；Annexin V荧光试剂盒购自晶美生物技术有限公司. 1.2方法 1.2.1细胞培养人宫颈癌C33A，SiHa和HeLa细胞，在含100 mL/L胎牛血清，1×105 U/L青霉素、链霉素的RPMI1640培养液中，37℃，50 mL/L CO2保持饱和湿度培养. 1.2.2MTT法检测不同浓度Res对C33A，SiHa和HeLa细胞的生长抑制作用取处于对数生长期的C33A，SiHa和HeLa细胞，调整细胞密度为(6~8)×107/L，接种于96孔板，每孔100 μL，细胞贴壁后，实验组加入不同浓度的Res 100 μL，使其终浓度分别为12.5，25，50，100，200，300，400，600 μmol/L；同时设置空白对照组、溶剂对照组和调零孔，每个剂量设3个平行孔. 培养板放回孵箱继续培养24，48，72 h. 取出培养板，每孔加入新鲜配置的MTT 20 μL（浓度为5 g/L），继续培养4 h，吸弃上清液，加入DMSO 150 μL，在平板摇床摇10 […]

Inventors 潘建春, 徐英 Applicant 温州医学院 ABSTRACT 本发明涉及一种联合用药，白藜芦醇与胡椒碱联用用于治疗抑郁症。经过动物实验证明，具有较好的抗抑郁作用，是一种较有前途的天然抗抑郁药剂，可用于制备治疗抑郁症的药物。 CLAIMS(1) 1.白藜芦醇与胡椒碱联用用于制备治疗抑郁症药物的用途。 DESCRIPTION 白藜芦醇与胡椒碱联用用于制备治疗抑郁症药物的用途 技术领域 [0001] 本发明涉及白藜芦醇与胡椒碱联用的一种新用途，特别是涉及用于制备治疗抑郁症药物的用途。 背景技术 [0002] 抑郁症是一种严重影响身心健康的情感障碍性精神疾病。随着人们生存和发展压力日益增加，抑郁症已成为现代社会的常见病。重度抑郁症患者表现为脑内单胺神经递质特别是去甲肾上腺素（NE)和5-羟色胺（5-HT)反射性地改变。目前，药物治疗是对抑郁症治疗的首选选择。临床上有几种典型的抗抑郁药都是通过提高单胺类物质水·平如5-HT、NE发挥抗抑郁作用。但是大多数药物都具有不良反应，而且治疗效果不是很好。所以，对药物的有效性和安全治疗因素的研究显得意义重大。由于中国传统药用植物具有良好的顺应性和温和的副作用，被广泛应用于精神疾病的治疗。在我国的历史中，虎杖是一种对精神疾病具有良好治疗作用的植物。其主要有效成分反式白藜芦醇具有多种药理活性，如改善学习记忆、抗炎、抗氧化及神经保护等。研究显示，反式白藜芦醇具有抑制神经胶质细胞的单胺氧化酶（MAO)活性的能力。MAO是线粒体同工酶，可特异性催化代谢单胺类神经递质，如5-HT、NE、DA及其他微量胺类物质。MAO抑制剂对一些神经精神疾病有很好的治疗作用，比如情绪障碍、帕金森综合症等。近期对大鼠的研究显示，反式白藜芦醇可抑制大鼠脑内NE和5-HT的再摄取。但是反式白藜芦醇是否是通过对MAO活性的抑制，进而增加脑内胺类神经递质的水平尚无定论。

Inventors 徐英, 潘建春, 李高文, 李 善, 尤文挺 Applicant 温州医学院 ABSTRACT 本发明涉及白藜芦醇用于制备治疗抑郁症药物的用途，经过动物实验证明白藜芦醇具有较好的抗抑郁作用，是一种较有发展前途的天然抗抑郁剂，可用于制备治疗抑郁症的药物。 CLAIMS(1) 1.白藜芦醇用于制备治疗抑郁症药物的用途。 DESCRIPTION 白藜芦醇用于制备治疗抑郁症药物的用途[0001] 技术领域 [0002] 本发明涉及白藜芦醇的一种新用途，特别是涉及白藜芦醇用于制备治疗抑郁症药物的用途。 [0003] 背景技术 [0004] 抑郁症是一种中枢神经系统致残性疾病，随着社会现代化进程的加快，各种应激因素导致的抑郁症已成为现代社会的常见病和多发病。目前全世界约有3％-5％的人罹患抑郁症，位居致残性疾病的首位。发病率高且难以根治的抑郁症正悄悄地构建可观的抗抑郁药市场，这正是近年来国内外对中枢神经系统药物的研究和开发特别活跃的主要原因之一。所以，研究和开发新型、高效、低毒副作用的抗抑郁药始终是精神药理学领域的一个重要研究课题。 由于抑郁症的病因复杂，涉及到交感神经、内分泌和免疫系统等机体多个方面。“单胺假说”是抑郁症机制研究的主流观点，认为单胺类神经递质(5-羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺神经递质)在抑郁症的病因、病理中起关键作用。目前临床上使用的抗抑郁药一般是通过影响单胺递质的重吸收、抑制单胺的代谢或阻断突触前抑制性自主或非自主受体而发挥作用。药物大致可分成三类：1.单胺重摄取抑制剂；2.单胺氧化酶抑制剂；3.5-HT受体拮抗剂。由于临床上使用的这些药物大约只对65％的病人起效，而且许多药物疗效并不稳定，毒副作用较大，生物利用度不高，一般要在2-4周起效。因此，从天然植物中开发安全有效、毒副作用小，生物利用度高的天然抗抑郁药成为这一领域的研究方向。白藜芦醇(Resveratrol)是一种多酚类物质，其化学式为3，5，4′-三羟基二苯乙烯(3，5，4′-trihydroxysitlbene)，广泛存在于天然植物中，尤其在葡萄科植物果皮中含量最高。白藜芦醇为脂溶性物质，易通过血脑屏障。研究表明，白藜芦醇具有抗氧化、免疫调节、抗衰老及预防神经退行性疾病等作用，目前尚未见将白藜芦醇用于治疗抑郁症的研究报道。 [0005] 发明内容 [0006] 本发明的目的提供白藜芦醇的一种新用途。 [0007] 经过动物实验发现白藜芦醇具有较好的抗抑郁作用，是一种较有发展前途的天然抗抑郁剂，可用于制备治疗抑郁症的药物。 [0008] 具体实施方式 [0009] 以下通过实施例说明本发明。 [0010] 实施例1：小鼠悬尾实验，强迫游泳实验，自主活动实验 [0011] 1、受试药物 [0012] 名称：白藜芦醇(Resveratrol) [0013] 性状：类白色精细粉末，气特殊，味淡，从虎杖中提取 [0014] 来源：购自陕西森佛生物技术有限公司，纯度为98％ [0015] 药物的配置：用0.5％浓度的羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶解白藜芦醇，分别配成10mg/kg，20mg/kg，40mg/kg和80mg/kg四个剂量，按0.1ml/10g剂量给予小鼠灌胃口服。 [0016] 2、对照药物 [0017] 盐酸丙咪嗪(Imipramine)：购自美国Sigma公司，临用前用双蒸水配置成10mg/kg浓度，按上述规格给予小鼠腹腔注射。 [0018] 3、动物及分组 [0019] ICR雄性小鼠，体重20-24g。温州医学院实验动物中心提供。 [0020] 动物随机分为6组，正常对照组，白藜芦醇10mg/kg，20mg/kg，40mg/kg和80mg/kg四个剂量组以及阳性对照药丙咪嗪组，每组动物12只。 [0021] 4、实验方法 [0022] ①小鼠悬尾实验：按照文献(SteruL，ChermatR，ThierryB，etal.Thetail suspensiontest：a new method for screeningantidepressants in mice[J].Psychopharmacol，1985，85：367.)进行，给药后60min(白藜芦醇i.g.)或者30min(丙咪嗪，i.p.)，在距小鼠尾尖部末梢约2cm的部位用胶布固定于铁架台上，使小鼠头向下悬挂，倒挂于箱子(30cm×30cm×25cm)中，头部距离箱底15cm。开始时，小鼠头部上下左右活动，企图找到攀抓的地方，一段时间后因失望而活动次数减少，即出现间断性不动。观察6min内实验动物行为，并记录后4min内小鼠的不动时间。 [0023] […]

白藜芦醇与消化系统疾病 白藜芦醇与消化性溃疡： 研究表明，白藜芦醇通过抑制促炎因子的表达、中性粒细胞的富集以及清除自由基抗氧化等多种途径，起到保护胃黏膜屏障防御功能以及在胃黏膜损伤后降低氧化应激水平，加速炎症修复的双重作用。

据国外媒体报道，美国进行的一项新研究发现，喝红葡萄酒可以防止视力恶化。研究人员发现，在葡萄以及其他水果中发现的一种物质可能保护眼部血管免受衰老导致的损伤。这种化合物被称之为“白藜芦醇”，可以起到防止血管受损的作用。白藜芦醇是一种天然化合物，可以在很多植物中生成，可以抵御异常血管增生，防止细菌和真菌感染。研究发现，葡萄皮中的白藜芦醇含量特别高。 虽然葡萄酒有很多好处，但不要忘了它还是酒，只要有酒精成分多少都会对肝脏造成威胁，所以在饮用上也是要有所节制，并且也不是人人都能喝。 内容来源：北京米赫医院-人工角膜